導航
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鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumannii),屬于革蘭氏陰性菌,是一種嚴格需氧、非乳糖發酵的條件致病菌,移動性不高,但生命力極強,可廣泛地存在于大自然中。
該菌是不動桿菌屬細菌中在醫院感染中常見的一種,也是水產養殖業動物的病原菌。它通常會引起菌血癥,肺炎,腦膜炎,腹膜炎,心內膜炎,以及泌尿道和皮膚感染。鮑曼不動桿菌已經成為醫院感染的主要來源,尤其是重癥監護室。
近些年來,鮑曼不動桿菌被人們發現對許多常用的抗生素都耐藥,包括β內酰胺類和氨基糖甙類。其中,需要機械通氣的免疫力下降患者最具有感染不動桿菌的高風險。
而鮑曼不動桿菌的傳統檢測方法相較困難,一方面由于大量抗生素及化療約物的應用,導致細菌生物學特性發生變化,影響細菌細胞壁的合成及細胞膜的通透性,且由于該菌初次分離時伴有其他雜菌生長,雖然鑒定所用為單個菌落,但多種細菌共存于一個平板,各菌在生長代謝過程中可能會產生一些物質,干擾鮑曼不動桿菌的正常生長。
另一方面傳統鮑曼不動桿菌的檢測鑒定操作要求嚴格,存菌液的濃度、均勻度、溫度及細菌的純度等多方面都有其特定的要求。鮑曼桿菌的生化反應較弱,大多生化反應均為陰性,若實際操作過程中在某一方面不夠重視,或某一生化反應的差異導致細菌鑒定結果的不同,都可能導致鑒定結果的差異。
因此,能夠精準而快速的檢測多重耐藥的不動桿菌尤為重要。不動桿菌顯色培養基(貨號:M1938,Hicrome Acinetobacter Agar Base)【需要其中一種添加劑:MDR 選擇性添加劑(貨號:FD271)/利茲不動桿菌選擇性添加劑(貨號:FD335)】適用于檢測從環境和臨床樣本中選擇性分離多重耐藥不動桿菌,35-37°C培育24-48小時即出結果(如下圖,多重耐藥不動桿菌菌落顯紫色)。
該顯色培養基中的復合顯色劑針對的是不動桿菌的特異性酶,因此特異性高,優于傳統的以生化代謝反應為分離基礎的利茲不動桿菌瓊脂(Leeds Acinetobacter Agar Base,HiMedia貨號M1839)。
培養基所需的添加劑如FD271為氨芐青霉素鈉鹽和頭孢他啶,可選擇性分離耐藥型不動桿菌。該培養基中的特別蛋白胨提供氮源、碳源化合物、氨基酸、維生素和其他必要的生長因子。氯化鈉維持滲透壓平衡。選擇因子抑制革蘭氏陽性菌。
非耐藥型不動桿菌不會在該培養基上生長,而耐藥型不動桿菌如鮑曼不動桿菌ATCC BAA-1605(對頭孢他啶、慶大霉素、替卡西林、哌拉西林、氨曲南、頭孢吡肟、環丙沙星、亞胺培南和美羅培南有抗藥性,對阿米卡星和妥布霉素敏感)則可旺盛生長,其回收率大于50%。該不動桿菌顯色培養基特別適合用于不動桿菌的耐藥研究。
對不動桿菌具體菌種的確證性鑒定可使用HiMedia公司生產的不動桿菌鑒定試劑盒(貨號:KB014,HiAcinetobacter™ Identification Kit)(下圖),操作方便,節省時間。
不動桿菌鑒定試劑盒包含的鑒定條含24種生化鑒定反應:
A部分:
第1孔:吲哚試驗
第2孔:伏普試驗
第3孔:檸檬酸鹽試驗
第4孔:賴氨酸試驗
第5孔:鳥氨酸試驗
第6孔:精氨酸試驗
第7孔:硝酸鹽還原試驗
第8孔:丙二酸試驗
第9孔:尿素酶試驗
第10孔:苯丙氨酸脫氨試驗
第11孔:H2S產生試驗
第12孔:ONPG試驗
B部分:
第1孔至第12孔:糖發酵試驗
每孔接種50l菌液,35 – 37°C孵育,18-24h后即可觀察結果。生化反應的結果依據每孔顏色與試劑盒中的結果詮釋表對照,以判定陰性陽性,再通過菌種標準表鑒定不動桿菌菌種。
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