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教你葉酸測定的小竅門
葉酸是維生素 B 復合體之一,它有促進骨髓中幼細胞成熟的作用,可改善血管內皮功能、預防心血管疾病。人自身無法合成,需要從食物中攝取。人類如缺乏葉酸可引起巨紅細胞性貧血以及白細胞減少癥。
葉酸是一組化學結構相似,生化特性相近的化合物統稱,是由喋啶、對氨基苯甲酸和1個或多個谷氨酸結合而成。食物中的葉酸絕大多數是以喋酰多谷氨酸(或稱多谷氨酸葉酸)的形式存在的。食物葉酸經小腸粘膜細胞內特異葉酰多谷氨酸水解酶的作用,水解為喋酰單谷氨酸后吸收。
吸收后的單谷氨酸葉酸一部分又轉變為多谷氨酸葉酸,在肝臟、紅細胞及其他組織細胞內貯存,其余部分則以單谷氨酸葉酸的形式分布于血漿、組織液、膽汁及尿液中。肝臟的葉酸濃度是血漿的幾百倍,但其單谷氨酸葉酸濃度與血漿相近。
據悉,一個成年人一天大約需要400微克天然葉酸,懷孕婦女大約需要600微克,哺乳期婦女需要500微克。而食品中添加的大多是人工葉酸,它必須在人體中轉化為有活性的天然葉酸才能利用。補充太多的人工葉酸并非好事,并阻礙天然葉酸的吸收,因此美國醫學研究所規定每天攝入的人工葉酸的上限是1000微克。
因此,檢測食品中的葉酸含量很有意義,由于各種樣品中成分復雜,葉酸的測定也比較復雜。葉酸含量的測定方法很多,通常情況下,檢測食品中葉酸的含量,我們采用微生物的方法。
我國“食品中葉酸的測定”標準規定了食品中葉酸的測定方法。葉酸是鼠李糖乳桿菌生長所必需的營養素,在一定控制條件下,將鼠李糖乳桿菌液接種至含有試樣液的培養液中,培養一段時間后測定透光率(或吸度值),根據葉酸含量與透光率(或吸光度值)的標準曲線計算出試樣中葉酸的含量。
即用鼠李糖乳桿菌的生長狀況來測定葉酸含量。但我們在實驗過程中經常會遇到一些問題,如使用的葉酸測定培養基含有痕量葉酸,導致測定結果偏高;重復試驗結果偏差大;實驗準確性不高等問題。這個時候很有可能是你選用的培養基有問題。我們缺少的是一款質量可靠的葉酸測定培養基。
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